Fytosterolin havaitsemismenetelmä

Kasvisterolien varhaiset havaitsemismenetelmät sisältävät digitoniinimenetelmän, entsymaattisen menetelmän ja näkyvän spektrofotometrian. Digoniinimenetelmän havaitsemisperiaate on, että yksi sterolimolekyyli ja yksi digitoniinimolekyyli muodostavat valkoisen kompleksin, ja sen toiminta on monimutkaista ja herkkyys pieni. Entsymaattisen havaitsemisen periaate on, että sterolien saippuoitumisen jälkeen syntyy steroliketoneja ja vetyperoksidia hapettamalla kolesterolioksidaasia, jotka oksidaasi katalysoi ja reagoivat väriltään 4-aminoantipyriinin ja fenolin kanssa. Ja mittaa sitten aste 500 nm: ssä. Sen toiminta on monimutkaista ja heikkoa toistuvuutta. Näkyvän spektrofotometrian periaate on, että kun sterolit on liuotettu kloroformiin, ne reagoivat etikkahapon kanssa väkevän rikkihapon katalyysin alla. Absorbanssiarvo mitataan 678 nm: ssä, ja sen stabiilisuus, toistettavuus ja herkkyys ovat hyviä. Edellä mainituilla menetelmillä voidaan kuitenkin havaita vain sterolien kokonaispitoisuus, eikä sterolikomponentteja voida kvantifioida, mikä on vaikea täyttää teollisen ja kliinisen testauksen tarpeet. Sterolikomponenttien kvalitatiivisiin ja kvantitatiivisiin detektiomenetelmiin kuuluvat ohutkerroskromatografia, kaasukromatografia ja korkean suorituskyvyn nestekromatografia-HPLC.